Estudo retrospectivo da leptospirose canina em hospital veterinário escola no município de Londrina, Pr / Retrospective study of canine leptospirosis in a veterinary school hospital in the municipality of Londrina, Pr / Estudio retrospectivo de leptospirosis canina en un hospital veterinario escolar del municipio de Londrina, Pr

O objetivo do trabalho foi relatar a ocorrência de casos de cães com Leptospira spp. no Hospital Veterinário de Londrina. Foram avaliados 5.454 prontuários, durante os meses de janeiro a dezembro de 2016, e selecionados os que apresentaram solicitação de exame para Lepstopira por meio da técnica de campo escuro (CE). Nos positivos pela técnica CE dados sobre o sexo, sinais clínicos, endereço, data do atendimento e resultado na SAM foram coletados. A análise dos dados foi realizada pelo programa EpiInfo (7.2.3.1), dos 5.454 prontuários nos quais foi solicitado exame CE em 7,06% (385/5.454), e nesses, 13,76% (53/385) foi identificada a presença da espiroqueta. Dos animais positivos na técnica CE, 20,75% (11/53) foram reagentes na SAM. O sorovar Canicola foi o mais frequente em 90,91% (10/11) dos animais, apresentando títulos variados de 100 a 12.800. Para o sorovar Pomona 9,09% (1/11) dos animais apresentaram títulação de 100. Os sinais clínicos mais observados foram apatia em 58,49% (31/53), azotemia em 49,06% (26/53) e êmese em 49,06% (26/53) dos casos. Quanto ao sexo, os machos constituíram 71,70% dos casos e as fêmeas 28,30% (p=0,0015). Os resultados demonstraram a presença de Leptospira spp. entre os animais atendidos no hospital veterinário de Universidade Estadual de Londrina e reforçam a importância do sorovar Canicola entre os cães, visto que esse foi o mais frequente entre os sorovares e que apresentou os maiores títulos.(AU)

The purpose of this work is to report the occurrence of cases of dogs with Leptospira spp. at the Veterinary Hospital of Londrina. A total of 5,454 medical records were evaluated from January to December 2016, and data obtained from the examination for Lepstopira using the dark field technique (DF) were selected. In cases which were positive by the DF technique, data on gender, clinical signs, address, care data, and SAM results were collected. Data analysis was performed using the EpiInfo program (7.2.3.1). From the total 5,454 medical records in which DF examination was requested, in 7.06% (385/5.454), and from those, 13.76% (53/385) were positive for Leptospira. From the animals positive in the DF technique, 20.75% (11/53) were reactive in SAM. The Canicola serovar was the most prevalent, being present in 90.91% (10/11) of the animals, with titers ranging from 100 to 12,800. For the Pomona serovar, 9.09% (1/11) of the animals presented a title of 100. The most frequent clinical signs observed were apathy, in 58.49% (31/53); azotemia in 49.06% (26/53); and emesis in 49.06% (26/53) of the cases. As for gender, male animals constituted 71.70% of the cases and female 28.30% (p = 0.0015). The results demonstrated the presence of Leptospira spp. among animals treated at the Veterinary Hospital of the State University of Londrina which reinforces the importance of the Canicola serovar among dogs, since it was the serovar with the highest prevalence and highest titer found.(AU)

El objetivo de este trabajo fue reportar la ocurrencia de casos de perros con Leptospira spp. en el Hospital Veterinario de Londrina. Se evaluaron un total de 5.454 historias clínicas de enero a diciembre de 2016, y se seleccionó los que presentaron solicitud de examen de Lepstopira mediante la técnica de campo oscuro (CE). En los positivos por la técnica de CE se recogieron datos de sexo, signos clínicos, domicilio, fecha de atención y resultado en la SAM. El análisis de los datos se realizó mediante el programa EpiInfo (7.2.3.1), de las 5.454 historias clínicas en las que se solicitó examen CE en el 7,06% (385/5.454), y en estas, el 13,76% (53/385) se identificaron la de espiroqueta. De los animales positivos en la técnica CE, el 20,75% (11/53) fueron reactivos en la SAM. El serovar Canicola fue el más frecuente en el 90,91% (10/11) de los animales, con títulos que oscilaron entre 100 y 12.800. Para el serovar Pomona, el 9.09% (1/11) de los animales tuvo un título de 100. Los signos clínicos más observados fueron apatía en 58.49% (31/53), azotemia en 49.06% (26/53) y emesis en 49.06% (26/53) de los casos. Cuanto al sexo, los machos constituyeron el 71,70% de los casos y las hembras el 28,30% (p = 0,0015). Los resultados demostraron la presencia de Leptospira spp. entre los animales tratados en el Hospital Veterinario de la Universidad Estatal de Londrina y refuerzan la importancia del serovar Canicola entre los perros, ya que este fue el más frecuente entre los serovares y tuvo los títulos más altos.(AU)

Anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in sheep from Paraná state, South Brazil: prevalence and associated factors / Anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum em ovinos do estado do Paraná, sul do Brasil: prevalência e fatores associados

Abstract The aim of this study was to evaluate the seroprevalence and factors associated with the presence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies in sheep from Paraná state. The detection of antibodies for T. gondii and N. caninum was performed by homemade and commercial indirect ELISA, respectively. Multiple logistic regression analysis was used to verify the factors associated with the seroprevalence. Antibodies anti-T. gondii and anti-N. caninum were observed in 42.7% and in 17.6% of the animals, respectively. The protective factors associated to seropositive were "some level of confinement" (full or semi-extensive confinement) (OR=0.53) for T. gondii and "use of skilled labor" (OR=0.64) for N. caninum. The risk factors were "presence of cats" (OR=1.75) for T. gondii and "feeding of dogs with sheep placental remains" (OR=1.79) for N. caninum. In addition, to presenting a significant and simultaneous seroprevalence for both agents (9.9% of the animals), the results also indicate that deficiencies in management and environmental sanitation, the presence of reservoirs, and types of exploitation enhance the seropositivity. Thus, studies like this might support sanitary programs and public policies for the prevention of T. gondii and N. caninum in the sheep herds of Paraná state.

Resumo O objetivo deste estudo foi avaliar a soroprevalência e os fatores de risco associados à presença de anticorpos contra Toxoplasma gondii e Neospora caninum em ovinos do Paraná. A detecção dos anticorpos para T. gondii e N. caninum foi realizada, usando-se testes de ELISA indireto caseiro e comercial, respectivamente. A análise de regressão logística múltipla foi usada para verificar os fatores de risco associados à soroprevalência. Anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum foram observados em 42,7% e em 17,6% dos animais, respectivamente. Os fatores de proteção associados à soropositividade foram "algum nível de confinamento (confinamento ou semiextensivo)" (OR=0,53) para T. gondii e "presença de mão de obra especializada" para N. caminum (OR=0,64). Os fatores de risco foram "presença de gatos" para T. gondii (OR=1,75) e "alimentação de cães com resíduos placentários" (OR=1,79) para N. caninum. Além de apresentar uma significante e simultânea soroprevalência para ambos os agentes (9,9% dos animais), os resultados também indicam que as deficiências em gestão e saneamento ambiental, a presença de reservatórios e os tipos de exploração favorecem a soropositividade. Dessa forma, estudos como estes podem auxiliar em programas sanitários e políticas públicas para a prevenção de T. gondii e N. caninum nos rebanhos ovinos do Paraná.

Evaluation of an active and early surveillance methodology for visceral leishmaniasis by molecular detection in road-killed wild fauna / Avaliação de metodologia de vigilância ativa e precoce da leishmaniose visceral por detecção molecular em fauna silvestre atropelada

Abstract The present study aimed to evaluate a methodology for active surveillance of visceral leishmaniasis by detecting Leishmania DNA in organs of wild road-killed animals from November 2016 to October 2018 in the North of Paraná, Brazil. The collection points of road-killed wild animals were georeferenced. The animals were autopsied and samples of bone marrow, lymph node, liver, spleen, and ear skin were collected. Genomic DNA was extracted and subjected to PCR for amplification of Leishmania spp. 18S, kinetoplastic DNA (kDNA), HSP70, and ITS1 genes, and DNA sequencing was performed. The primers used for the amplification of kDNA, ITS1, and HSP70 genes presented non-specific results. Of the 66 mammals collected from 24 different municipalities, one Southern Tamandua (Tamandua tetradactyla) presented DNA of Leishmania spp. in lymph nodes by 18S PCR. DNA sequencing confirmed the results of the subgenus, Viannia, identification. We suggest using the methodology showed in the present study in the active and early surveillance of visceral leishmaniasis in a non-endemic area.

Resumo O objetivo do presente estudo foi avaliar uma metodologia de vigilância ativa da leishmaniose visceral por meio da detecção de DNA de Leishmania em órgãos de animais silvestres atropelados, de novembro de 2016 a outubro de 2018, no Norte do Paraná, Brasil. Os pontos de coleta dos animais silvestres atropelados foram georreferenciados. Os animais foram autopsiados e amostras de medula óssea, linfonodo, fígado, baço, e pele de orelha foram coletados. DNA genômico foi extraído e submetido à PCR para amplificação de quatro diferentes regiões de Leishmania spp.: 18S, kDNA, HSP70 e ITS1, sequenciamento de DNA foi realizado. Os iniciadores utilizados para a amplificação dos genes kDNA, ITS1 e HSP70 apresentaram resultados inespecíficos. Dos 66 mamíferos coletados em 24 diferentes municípios, um tamanduá-mirim (Tamandua tetradactyla) apresentou DNA de Leishmania spp. em linfonodo na PCR, que amplificou o gene 18S. O sequenciamento de DNA confirmou o resultado e demonstrou a presença do subgênero Viannia. Sugere-se o uso da metodologia apresentada no presente estudo na vigilância ativa e precoce da leishmaniose visceral em área não endêmica.

Techniques for inactivating Toxoplasma gondii oocysts: a systematic review / Técnicas para inativar oocistos de Toxoplasma gondii: uma revisão sistemática

Abstract The oocyst, a resistant form of Toxoplasma gondii, plays an important role in the transmission of this protozoan. The objective of this review was to report the methods capable of inactivating oocysts through a systematic review of the literature carried out in the Scientific Electronic Library Online, Web of Science, Science Direct, PubMed and Scopus databases. The keywords searched were (((effects OR infectivity OR resistance) AND Toxoplasma) AND oocyst). We selected 16 articles that described 309 different treatments. Among all the protocols evaluated, 35.60% (110/309) were effective in inactivating oocysts. Physical methods were more effective than other methods (p <0.05). Sporulated oocysts and the T. gondii VEG strain were more resistant (p <0.05) to treatments. Although it is effective against viruses and bacteria, the use of disinfectants in water has little or no effect on T. gondii oocysts. The use of radiation and pressure were effective in inactivating oocysts, as these treatments do not include changes in temperature, they can be used in foods for raw consumption, such as vegetables, as it will not cause substantially changes in their physical and chemical characteristics. Therefore, these methods can be viable alternatives for the control of T. gondii.

Resumo O oocisto, forma resistente do Toxoplasma gondii, desempenha um papel importante na transmissão desse protozoário. O objetivo desta revisão foi relatar os métodos capazes de inativar oocistos por meio de uma revisão sistemática da literatura realizada nas bases de dados Scientific Electronic Library Online, Web of Science, Science Direct, PubMed e Scopus. As palavras-chave pesquisadas foram (((efeitos OR infectividade OR resistência) AND Toxoplasma) AND oocyst). Foram selecionados 16 artigos que descreveram 309 tratamentos diferentes. Dentre todos os protocolos avaliados, 35,60% (110/309) foram eficazes na inativação de oocistos. Os métodos físicos foram mais eficazes do que outros métodos (p <0,05). Oocistos esporulados e a cepa VEG de T. gondii foram mais resistentes (p <0,05) aos tratamentos. Embora seja eficaz contra vírus e bactérias, o uso de desinfetantes na água tem pouco ou nenhum efeito sobre os oocistos de T. gondii. O uso de radiação e pressão foram eficazes na inativação de oocistos. Como esses tratamentos não incluem mudança de temperatura, podem ser utilizados em alimentos de consumo cru, tais como vegetais, pois não acarretarão substancialmente alterações nas suas características físico-químicas. Portanto, esses métodos podem ser alternativas viáveis ​​para o controle de T. gondii.

Toxoplasma gondii and Neospora caninum infections and factors associated in goats in the Parana state, Southern Brazil / Infecções por Toxoplasma gondii e Neospora caninum e fatores associados em caprinos no estado do Paraná, Sul do Brasil

Abstract The aim of this study was to determine the occurrence of anti-Toxoplasma gondii and anti-Neospora caninum antibodies and their associated factors among goats in farms from the Paraná state, South Brazil. The serological analysis was performed by indirect ELISA on 629 goat serum samples collected from 32 farms distributed in five mesorregions from the state. Seropositivity was observed in 30.7% of the animals for T. gondii, 6.3% for N. caninum, and 3.0% for both agents. Final multiple regression models showed that the use of assisted reproduction decreased the chance of seropositivity for T. gondii (PR=0.70) and the slaughtering site on the farm (PR=2.03) increased it. To N. caninum, the supplying concentrated feed to animals (OR=4.80) and animal pre-weaning death (OR=9.96) increased the chance of seropositivity. The variables associated with these seropositivities suggest deficiencies in sanitation and reproductive management. In addition, it recognizes critical points of infection for animal production management.

Resumo O objetivo desse estudo foi avaliar a ocorrência de anticorpos anti-Toxoplasma gondii e anti-Neospora caninum e seus fatores associados em caprinos de propriedades do Estado do Paraná, Sul do Brasil. A análise sorológica foi realizada, utilizando-se ELISA indireto em 629 amostras de soro caprino, coletadas em 32 propriedades distribuídas em cinco mesorregiões do Estado. A soropositividade foi observada em 30,7% dos animais para T. gondii, 6,3% para N. caninum e 3,0% para ambos. Os modelos finais de regressão múltipla mostraram que o uso de reprodução assistida reduziu a chance de soropositividade para T. gondii (PR=0,70), enquanto a presença no local de abate na fazenda (PR=2,03) aumentou. Para N. caninum, o fornecimento de ração concentrada (OR=4,80) e a morte dos animais no pré-desmame (OR=9,96) aumentaram a chance de soropositividade. O estudo das variáveis associadas às soropositividades sugere deficiências no saneamento e no manejo reprodutivo dos Animais. Além disso, reconhece pontos críticos para a infecção no manejo da produção animal.

Molecular diagnosis of the curly lettuce parasitic contamination from hydroponic cultivation from supermarkets / Diagnóstico molecular da contaminação parasitária de alface crespa de cultivo hidropônico em supermercados

Abstract The consumption of vegetables has increased in recent years due to the search for a healthier diet that is rich in fiber and has fewer calories. To assess the parasitic contamination of lettuce sold in markets, a survey of parasites was carried out from a supermarket chain in the city of Londrina, Paraná. A total of thirty samples of lettuce were purchased in the ten markets visited, three in each, of which ten were conventionally cultivated, ten were hydroponically cultivated, and ten were organically cultivated. All samples were analyzed using the sedimentation methods of Hoffman, Pons and Janer and the fluctuation method of Faust and colleagues and Willis with adaptations. In addition, the samples were subjected to DNA extraction by a commercial kit and polymerase chain reaction to detect Toxoplasma gondii, Cryptosporidium spp. and Giardia spp., which are protozoa that cause food and waterborne parasitic outbreaks. All samples were negative for sedimentation and flotation techniques. One of the hydroponically cultivated samples was positive for T. gondii. The results demonstrate the risk of curly lettuce contamination from hydroponic cultivation and the need for proper cleaning of these foods before consumption.

Resumo O consumo de vegetais aumentou nos últimos anos devido à busca de uma dieta mais saudável, rica em fibras e com menos calorias. Para avaliar a contaminação parasitária de alface vendida nos mercados, foi realizado um levantamento de parasitas em vegetais folhosos de uma cadeia de supermercados da cidade de Londrina, Paraná. Um total de 30 amostras foram compradas nos dez mercados visitados, três em cada, dos quais dez foram convencionalmente cultivados, dez cultivados hidroponicamente e dez foram cultivados organicamente. Todas as amostras foram analisadas, usando-se os métodos de sedimentação de Hoffman, Pons e Janer e o método de flutuação de Faust e colaboradores e Willis com adaptações. Além disso, as amostras foram submetidas à extração de DNA por um kit comercial e reação em cadeia da polimerase (PCR) para detectar Toxoplasma gondii, Cryptosporidium spp. e Giardia spp., que são protozoários causadores de surtos transmitidos pela água e alimentos. Todas as amostras foram negativas para técnicas de sedimentação e flutuação. Uma das amostras cultivadas hidroponicamente foi positiva para T. gondii. Os resultados demonstram o risco de contaminação por alface crespa do cultivo hidropônico e a necessidade de limpeza adequada desses alimentos antes do consumo.

Investigation and environmental analysis of samples from outbreak of toxoplasmosis at research institution in Londrina, Paraná, Brazil, 2016 / Investigação e análise ambiental de amostras oriundas de surto de toxoplasmose em uma instituição de pesquisa em Londrina, Paraná, Brasil, 2016

Abstract The objective of this study was to report an outbreak of human toxoplasmosis at a research institution in Londrina, Paraná, from December 2015 to February 2016. Blood samples from 26 symptomatic individuals were collected and the microparticle chemiluminescence immunoassay was performed to detect IgM, IgG and specific IgG avidity test in the official laboratory. A total of 20 people with symptoms and serology compatible with acute toxoplasmosis (IgM positive and IgG with low avidity) were selected as cases, while 45 asymptomatic employees working in the same teams and during the same shifts were selected as controls. All the participants of the investigation answered an epidemiological questionnaire. Three samples of water and one sludge from the institution's supply cisterns, 10 soil samples, 11 plant samples, three cat fecal samples and one domestic feline cadaver were collected for analysis of the polymerase chain reaction (PCR) for T. gondii. After analyzing the epidemiological data, the consumption of vegetables in the restaurant of the institution was the only variable associated with the occurrence of the disease. In laboratory results, all the samples showed negative results to PCR. The rapid recognition of the outbreak, early notification and investigation could have broken the chain of transmission early, thus preventing the emergence of new cases. In addition, the adoption of good food handling practices could have prevented the occurrence of the outbreak.

Resumo O objetivo deste estudo foi relatar um surto de toxoplasmose humana em uma instituição de pesquisa em Londrina, Paraná, no período de dezembro de 2015 a fevereiro de 2016. Amostras de sangue de 26 indivíduos sintomáticos foram coletadas e o imunoensaio de quimioluminescência de micropartículas foi realizado para detectar IgM, IgG e teste de avidez de IgG específica em laboratório oficial. Um total de 20 pessoas com sintomas e sorologia compatíveis com toxoplasmose aguda (IgM positiva e IgG com baixa avidez) foi selecionado como casos, enquanto 45 funcionários assintomáticos que trabalhavam nas mesmas equipes e durante os mesmos turnos foram utilizados como controles. Todos os participantes da investigação responderam a um questionário epidemiológico. Foram coletadas três amostras de água e uma de lodo das cisternas de abastecimento da instituição, 10 de solo, 11 de vegetais, três amostras de fezes de gato e um cadáver de filhote felino doméstico para detecção de T. gondii pela reação em cadeia da polimerase (PCR). Após análise dos dados epidemiológicos, o consumo de hortaliças no restaurante da instituição foi a única variável associada à ocorrência da doença. Em resultados laboratoriais, todas as amostras apresentaram resultados negativos a PCR. O rápido reconhecimento do surto, notificação e investigação prematura poderia ter quebrado a cadeia de transmissão, evitando assim o surgimento de novos casos. Além disso, a adoção de boas práticas de manipulação de alimentos poderia ter impedido a ocorrência do surto.

Epidemiological relevance of dogs for the prevention of Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Leptospira spp / Relevância epidemiológica de cães para a prevenção de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leptospira spp

Abstract This study evaluated the seroprevalence of Toxoplasma gondii, Neospora caninum and Leptospira spp. in dogs from Foz do Iguaçu, Paraná, Brazil. Indirect immunofluorescent antibody test was used to detect antibodies anti-T.gondii and anti-N. caninum. Immunoenzymatic assay and microscopic serum agglutination were used for screening antibodies anti-T.gondii and anti-Leptospira spp., respectively. The results were: 67.02% of the samples reactive for T.gondii and 1.38% for N. caninum, both without statistically significant variables. For Leptospira spp. the results indicated seroprevalence of 23.11%. The analysis of the variables without distinction of serovar showed association for intrinsic characteristics as breed, age, nutritional status and dog category. The extrinsic variables as city region and access to the street presented association (p<0.05). The most prevalent serovars were: Canicola 59.47%; Bratislava 13.07% and Butembo 15.68%. Variables that make up the adjusted multiple analysis model using Leptospira spp. were: age, breed and nutritional status; serovar Canicola, sex, nutritional status and area (p<0.05); serovar Bratislava, lymphadenomegaly and presence of fleas (p<0.05). Given the results obtained, dogs can be used as sentinels for toxoplasmosis and leptospirosis in Foz do Iguaçu and other cities with similar outcomes. In addition, preventive measures should be taken by health authorities because they are zoonoses and humans are also at risk.

Resumo Este estudo avaliou a soroprevalência de Toxoplasma gondii, Neospora caninum e Leptospira spp. em cães de Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil. O teste de imunofluorescência indireta foi utilizado para detectar anticorpos anti-T. gondii e anti-N. caninum. Ensaio imunoenzimático e soroaglutinação microscópica foram utilizados para pesquisa de anticorpos anti-T. gondii e anti-Leptospira spp., respectivamente. Os resultados obtidos foram: 67,02% (435/649) das amostras reativas para T. gondii e, 1,38% (9/649) para N. caninum, ambas com ausência de variáveis significativas estatisticamente. Para Leptospira spp. os resultados indicaram soroprevalência de 23,11% (153/649). A análise das variáveis sem distinção de sorovar mostraram associação para caraterísticas intrísecas como raça, idade, estado nutricional e categoria de cães. Para as variáveis extrínsecas, a região da cidade e ter acesso à rua mostraram associação estatística (p<0,05). Os sorovares mais prevalentes foram: Canicola com 59,47% (91/153); Bratislava 13,07% (20/153) e Butembo 15,68% (24/153). As variáveis que compõem o modelo de análise multivariada ajustada usando como desfecho Leptospira spp. foram: idade, raça, estado nutricional e área. Para o sorovar Canicola, as variáveis significantes (p<0,05) foram sexo, estado nutricional e área; para o sorovar Bratislava, as variáveis significantes (p<0,05) foram linfadenomegalia e presença de pulgas. Dos resultados obtidos, cães podem ser usados como sentinelas para infecção por T. gondii e Leptospira spp. na cidade de Foz do Iguaçu e em outras cidades com desfechos similares. Além disso, medidas preventivas devem ser tomadas pelas autoridades de saúde, pois são zoonoses e os seres humanos também estão em risco.